微生物菌种保藏方法？ 中国有几个国家级微生物菌种保藏中心？

一、微生物菌种保藏方法？

1、传代保藏 传代保藏菌种是微生物保存中最常用的方法之一。很多微生物在低温或者干燥处理时，会很快死亡，为了保存菌种的活性，就要定期不断的进行菌种转接、培养后再保存。

2、斜面低温保藏 将待保藏的菌种接种在合适的斜面培养基上，在相应的条件下培养至得到充足的菌体或者孢子，随后密封试管置于4℃左右保存，具体保存温度按照保存菌种设定。保藏时间依微生物的种类从1个月到4个月不等。

3、冷冻干燥保藏 冷冻干燥保藏法为菌种保藏方法中最有效的方法之一，对一般生活力强的微生物及其孢子以及无芽胞菌都适用，这种方法适用于菌种长期保存，一般可保存数年至十余年。我国大多数生物制品菌种都是采用该法保藏。

4、半固体穿刺保藏 配制半固体培养基，高压湿热灭菌后倒于无菌试管中至约1/3，待培养基凝固，用接种环从平面培养基上挑取单菌落，穿入培养基若干次。在合适的条件下进行培养至菌体旺盛生长，之后密封试管，根据菌种特点在4 ℃左右或者凉爽干燥处保存。保存时间至少可以达到1 年，对于有些菌种甚至能达到20 年之久。

5、液氮超低温保藏 液氮超低温保藏法是菌种长期保藏的最有效最可靠的方法。液超低温保藏法是把菌种装在含有冷冻保护剂的安瓶瓶内，将该安瓶瓶放人液氮（-196℃）中保藏。

6、冷冻真空干燥保藏 将处于成熟期的微生物培养物悬浮于无菌的血清、卵白、脱脂奶或者海藻糖等保护剂中制成浓菌液，分装到无菌的安瓿瓶中，于低温冰箱中冷冻，达到预定温度后对浓菌液进行冷冻干燥处理，之后在真空状态下融封安瓿瓶，于20 ℃保藏。

7、蒸馏水保藏 蒸馏水保藏菌种的方法普遍的应用于医学微生物、食品微生物和工业微生物中。将菌体悬浮于蒸馏水中，即可在室温下保存数年，此法应注意避免水分的蒸发。

二、中国有几个国家级微生物菌种保藏中心？

中国普通微生物菌种保藏管理中心(China General Microbiological Culture Collection Center, CGMCC)成立于1979年，是以提供专业技术服务为主的公益性机构，1995年获得布达佩斯条约国际保藏中心的资格，是我国唯一同时提供一般菌种资源服务和专利生物材料保存的国家级保藏中心。中心设立在中国科学院微生物研究所。

中心致力于微生物资源的保护、共享和持续利用，尤其关注本土微生物资源的探索、发现和保存。在保证生物安全和保护知识产权的前提下，为工农业生产、卫生健康、环境保护、科研教育提供微生物物种资源、基因资源、信息资源和专业技术服务，促进我国生命科学研究和生物技术产业的发展。CGMCC的工作主要包括：广泛分离、收集、保藏、交换和供应各类微生物菌种；保存用于专利程序的各种可培养生物材料；微生物菌种保藏技术研究；微生物分离、培养技术研究；微生物鉴定和复核技术研究；保藏菌种的资料情报收集和提供及编辑微生物菌种目录。

CGMCC目前保存各类微生物资源超过5000种，46,000余株，用于专利程序的生物材料7100余株，微生物元基因文库约75万个克隆。2010年，CGMCC通过了中国质量认证中心组织的审核，获得了ISO9001：2008质量管理体系认证书、ISO14001：2004环境管理体系认证证书、GB/T28001-2001职业健康安全管理体系认证证书，成为国内首家通过质量、环境、职业健康安全管理体系认证的菌种保藏中心，标志着CGMCC质量管理的标准化、规范化、系统化提升到了新的水平。

CGMCC将坚持“科学服务，预防污染，安全优先，持续改进”的方针，加强微生物菌种资源管理和技术能力建设，推动CGMCC管理与服务走向国际化，为我国生命科学研究、生物技术创新及产业发展提供更加优质的专业技术服务

三、菌种保藏要使用什么菌种？

菌种保藏是指保持微生物菌株的生活力和遗传性状的技术。目的在于把从自然界分离到的野生型，或经人工选育得到的变异型纯种，使其存活、不丢失、不污染杂菌、不发生或少发生变异，保持菌种原有的各种特征和生理活性。

基本原理是使微生物的生命活动处于半永久性的休眠状态，也就是使微生物的新陈代谢作用限制在最低范围内。

干燥、低温和隔绝空气是保证获得这种状态的主要措施。

有针对性地创造干燥、低温和隔绝空气的外界条件，就是微生物菌种保藏的基本技术。选用4℃冰箱进行短时间的菌种保藏。

四、菌种保藏的依据？

菌种保藏是一切微生物工作的基础，其目的：是使菌种被保藏后不死亡、不变异、不被杂菌污染，并保持其优良性状，以利于生产和科研应用。菌种保藏的原理：是为了达到长期保持菌种的优良特性，核心问题是必须降低菌种变异率，而菌种的变异主要发生于微生物旺盛生长、繁殖过程，因此必须创造一种环境，使微生物处于新陈代谢最低水平，生长繁殖不活跃状态。

常用的方法主要有：常规转接斜面低温保藏法，半固体穿刺保藏法，液体石蜡保藏法，含甘油培养物保藏法等，沙土管保藏法。

特殊的有：真空冷冻干燥保藏法和液氮超低温保藏法。

五、临时保藏菌种的温度？

保藏方法：将菌种接种到固体斜面培养基上，然后在适宜的温度下进行培养，当菌落长成之后，将试管放置于冰箱中（4°C）进行保藏即可。

六、低温菌种保藏法特点？

斜面低温保藏法是一种最常用，最简便的菌种保藏方法。其特点是:一 简单易行，适用于各种菇类菌种保存， 是目前生产及科研普遍采用的一种方法。

二 保藏时间短，需六个月转接一次，转管次数 多菌丝变异的可能性大。

三 如改用橡皮塞并用石蜡扣 ，可保藏11年~3年 。

七、冷冻保藏适宜什么菌种？

菌种保藏是指保持微生物菌株的生活力和遗传性状的技术。目的在于把从自然界分离到的野生型，或经人工选育得到的变异型纯种，使其存活、不丢失、不污染杂菌、不发生或少发生变异，保持菌种原有的各种特征和生理活性

蘑菇可以冷冻，不过冷冻会破坏其细胞壁，造成脱水和营养流失，而且冷冻的蘑菇口感不好。食用蘑菇，又称食用菌、食用蕈菌、食用真菌，是指具有食用价值的子实体的大型真菌的统称。

八、甘油保藏菌种实验步骤？

准备材料：甘油保存菌种时，准备甘油、离心管、枪头的工具并消毒灭菌。 调配比例：根据菌种调配甘油，一般甘油和菌液的比例是20:80。 控制温度：根据冷藏时间使温度在零下20度或零下70度。 注意事项：严格控制温度。

甘油保存菌种的方法

甘油保存菌种的方法及步骤

1、准备材料

甘油保存菌种时，首先要根据需要保存的菌种，准备足够的甘油、离心管、枪头的工具，其中离心管要准备2ml容量大小，将准备好的工具放在121度的环境中消毒灭菌20分钟。

2、调配比例

根据菌种调配甘油，采用20%的甘油来保存菌种，那么甘油和菌液的比例就是20:80，菌种不同甘油的比例也不同，例如链球菌属保存时，除了甘油还需要少量的生理盐水制作保存液。

3、控制温度

将纯化后的菌种放入调配好的甘油保存液中，放在零下20度或者零下70度的环境中冷藏，温度不同保存的时间长短也不一样，零下20度的最多只能保存1年，而零下70度的保存时间为2-4年。

4、注意事项

甘油保存菌种时，必须要经过消毒灭菌，严格控制冷藏的环境温度，以免出现菌种死亡或者被污染，另外用来保存的菌种与标准菌菌株的特性不同，冷冻的降温速度要保持在1度/分钟。

九、临时保藏菌种的方法？

可以在固体斜面培养基上菌落长成后，放入冰箱低温保藏；或者用液体石蜡覆盖保藏法；还可以将微生物在极低温度（-70℃左右）下快速冷冻，然后在减压下利用升华现象除去水分（真空干燥）。

十、解磷菌种保藏的方法？

传代保藏菌种是微生物保存中最常用的方法之一。很多微生物在低温或者干燥处理时，会很快死亡，为了保存菌种的活性，就要定期不断的进行菌种转接、培养后再保存。