基因工程成功的关键？

一、什么是基因工程工具酶,有什么用?

基因工程的关键技术是DNA的连接重组。科学家根据分子遗传学的发现,应用生物化学提取和鉴定酶的技术,找到了一系列基因工程的工具酶。基因工程使用的工具酶具有一个重要特征：每一种酶都具有自身特定的功能。有的像"手术刀",可以进行DNA分子的特定切割；有的像"粘合剂",可以促进DNA分子之间的粘合和连接；有的像"砌砖机",可以合成完整的双链DNA分子．基因工程常用的工具酶可分为：限制性内切酶、DNA连接酶、DNA片段末端修饰酶等。

限制性核酸内切酶,简称限制酶。它的发现和应用为从细胞基因组中分离目的基因提供了重要工具。限制酶能够识别DNA大分子链上特定的核苷酸顺序,并能在某一特定部位将DNA断裂。这样,目的基因便有可能完整地存在于某一DNA片段上,然后再把它们分离出来。在基因工程中,限制酶是一种必不可少的工具酶,是进行DNA分子切割的特殊工具．因此它有"分子剪刀"或"分子手术刀"之称。

目前已经发现的限制酶多达20多种．每一种都有极强的特异性,可以准确无误地进行核苷酸的识别,决不会错切一刀。一般情况下,一种限制性内切酶能识别4－6个核苷酸序列。

为了便于DNA片段的连接往往用不同的酶对DNA片段末端进行修饰这种酶就是DNA片段末端修饰酶。

不同的DNA片段之间的连接需要另一种工具酶----连接酶的帮助．这种酶也是在细菌中发现的．如果说内切酶是对基因操作的"剪刀",那么连接酶就是"浆糊"。

二、什么是基因克隆载体?

目的基因在经过体外改造后,必须进人受体细胞内才能进行扩增和生物表达。但是用于DNA重组体的目的基因,不能直接引人受体细胞，因为每种生物都是长期进化的产物,具有很强的排他性．外源DNA如果单独进人受体细胞,必将被破坏。因此,必须有一种运载基因的载体作媒介物,才能达到目的．载体在基因工程中的作用,就像过河时必须有船一样．载体运载外源DNA进入受体细胞,是通过在载体自身的DNA核酸序列中插人外源DNA,再进人受体细胞内进行复制,在载体DNA复制时,外源DNA分子也获得了扩增和表达。

目前经常使用的载体,有质粒和病毒两类．各种不同的载体,尽管分子量大小、结构和用途上存在着较大的差异,但是作为载体,它们应该具备一些共同的特性：

1.能在受体细胞内进行独立和稳定的DNA自我复制．在其DNA插入外源基因后,仍然保持稳定的复