牡蛎幼虫保存方法?
一、牡蛎幼虫保存方法?
超低温冷冻保存方法。
选择活力95%以上的优质太平洋牡蛎担轮幼虫,用200目的筛绢过滤收集,加入适量添加剂,按担轮幼虫与抗冻保护剂的体积比9:1比例稀释混匀,在4℃孵育30分钟,分装于0.25ml或0.5ml麦管,分步程序降温至-180℃后投入液氮中长期保存。解冻时采用水浴解冻法,28℃水浴解冻5-10s,然后置于室温20℃至完全融化,加入到含5%BSA的新鲜灭菌海水检测担轮幼虫活力,获得复活的担轮幼虫高于70%。
本发明的太平洋牡蛎胚胎长期冷冻保存方法对于太平洋牡蛎人工繁育、种质保存、遗传多样性及可持续养殖等方面有着重要意义。
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